টিস্যু নমুনা বা পুরো অঙ্গগুলিতে এনজাইম ক্রিয়াকলাপের ত্রি-মাত্রিক, উচ্চ-রেজোলিউশন চিত্রগুলি পাওয়া এখন সম্ভব-টিস্যুর মধ্যে ফ্লোরোসেন্ট রঞ্জক অ্যাঙ্কর হিসাবে অনুসন্ধান অণুগুলির জন্য ধন্যবাদ যে এনজাইমগুলি দ্বারা সক্রিয় করা হয়। ম্যাপ করা অঙ্গটি একটি ক্লিয়ারিং প্রক্রিয়া দ্বারা স্বচ্ছ করা হয়। জার্নালে একটি জাপানি দল রিপোর্ট হিসাবে প্রয়োগ রসায়নএটি অ্যামিনোপেপটিডেস এন ক্রিয়াকলাপের পার্থক্যের দৃশ্যধারণের জন্য এবং মাউস কিডনিতে ইনহিবিটারগুলির প্রভাবগুলির জন্য অনুমতি দেয়।
শারীরবৃত্তীয় ক্রিয়াকলাপগুলি নিয়ন্ত্রণে এনজাইমগুলি গুরুত্বপূর্ণ ভূমিকা পালন করে এবং অস্বাভাবিক এনজাইম ক্রিয়াকলাপ বিভিন্ন প্যাথলজিকাল অবস্থার সাথে সম্পর্কিত। এনজাইম ক্রিয়াকলাপ অঙ্গ থেকে অঙ্গে পরিবর্তিত হয় পাশাপাশি একটি একক অঙ্গের বিভিন্ন অঞ্চলের মধ্যে। এইভাবে বিশদ স্থানিক রেজোলিউশন সহ টিস্যুগুলিতে এনজাইম ক্রিয়াকলাপের সুনির্দিষ্ট ইমেজিং পাওয়া তথ্যবহুল হবে। দুর্ভাগ্যক্রমে, উপযুক্ত কৌশলগুলির অভাব রয়েছে। এনজাইম ক্রিয়াকলাপের ইমেজিং মূলত ফ্লুরোসেন্স প্রোব দিয়ে চালিত হয়। যাইহোক, ফ্লুরোসেন্ট আলো সবেমাত্র টিস্যুগুলিতে প্রবেশ করে, তাই পুরো অঙ্গগুলির মতো বৃহত্তর নমুনাগুলি 3 ডি তে ম্যাপ করা যায় না। ক্লিয়ারিং নামে পরিচিত একটি প্রক্রিয়া এটিতে সহায়তা করতে পারে। ক্লিয়ারিং একটি traditional তিহ্যবাহী প্রক্রিয়া যার মাধ্যমে টিস্যু নমুনাগুলি বিভিন্ন দ্রাবক এবং রিএজেন্টগুলির সাথে অত্যন্ত স্বচ্ছ করা হয় – তাদের কাঠামো বজায় রেখে। যাইহোক, নিবিড় ধোয়ার সময়, ফ্লুরোসেন্ট প্রোবের মতো ছোট অণুগুলিও টিস্যু থেকে ধুয়ে যায়।
টোকিও বিশ্ববিদ্যালয়ের শিনসুক স্যান্ডোর নেতৃত্বাধীন একটি দল এখন পুরো, ক্লিয়ার অঙ্গগুলির মধ্যে উচ্চ-রেজোলিউশন 3 ডি-তে একটি এনজাইমের ক্রিয়াকলাপের চিত্রিত করার জন্য একটি নতুন পদ্ধতি তৈরি করেছে। উদাহরণ হিসাবে তারা অ্যামিনোপেপটিডেস এন (এপিএন) বেছে নিয়েছিল, একটি পেপটাইড বিভাজনযুক্ত এনজাইম যা বিভিন্ন শারীরবৃত্তীয় প্রক্রিয়াগুলির পাশাপাশি টিউমারগুলির বিকাশে গুরুত্বপূর্ণ ভূমিকা পালন করে। তাদের সাফল্য একটি বিশেষভাবে বিকশিত প্রোব অণুর কারণে যা ফ্লুরোসেন্ট ডাই (বডিপি), একটি “অ্যাঙ্করিং ইউনিট” এবং একটি অ্যামিনো অ্যাসিড গ্রুপ (অ্যালানাইন) নিয়ে গঠিত।
যদি কোনও সক্রিয় এপিএন উপস্থিত না থাকে তবে তদন্তটি অপরিবর্তিত থাকে এবং টিস্যু ক্লিয়ারিং প্রক্রিয়া চলাকালীন ধুয়ে ফেলা হয়। সক্রিয় এপিএন সহ অঙ্গগুলির অঞ্চলগুলিতে, এনজাইমটি অ্যাঙ্করিং ইউনিটকে সক্রিয় করে অ্যামিনো অ্যাসিড গ্রুপকে তদন্ত থেকে বিভক্ত করে। এটি আশেপাশের অঞ্চলে প্রোটিনগুলির সাথে সংযুক্ত থাকে এবং আশেপাশের টিস্যু কাঠামোর সাথে ফ্লুরোসেন্ট প্রোবকে দৃ ant ়ভাবে নোঙ্গর করে যাতে এটি ধুয়ে না যায়। এটি দলটিকে পুরো মাউস কিডনিতে ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপি সহ উচ্চ-রেজোলিউশন, এপিএন ক্রিয়াকলাপের 3 ডি মানচিত্র পাওয়ার অনুমতি দেয়। গবেষকরা কিডনির মধ্যে পৃথক টিউবুলার কাঠামোর মধ্যে এপিএন ক্রিয়াকলাপের পার্থক্যগুলিও কল্পনা করতে সক্ষম হন।
দলটি এপিএন ইনহিবিটারগুলির প্রভাবগুলিও অধ্যয়ন করেছে। তারা পরীক্ষামূলক অ্যান্টিটিউমার এজেন্ট অ্যাক্টিনোনিন এবং অন্য একটি এপিএন ইনহিবিটারের মধ্যে ফ্লুরোসেন্সের দমন করার ক্ষেত্রে বিভিন্ন নিদর্শন পর্যবেক্ষণ করেছে। এই পার্থক্যগুলি শোষণ, বিপাক এবং/অথবা ফার্মাকোকিনেটিক্সের পার্থক্যের ফলে হতে পারে। নতুন ইমেজিং প্রযুক্তিটি ওষুধ বিকাশের জন্য একটি নিরপেক্ষ মূল্যায়ন পদ্ধতির পথ উন্মুক্ত করে যা পুরো অঙ্গগুলিতে সেলুলার স্তরে ঘটে যাওয়া ক্ষুদ্র ঘটনাটিকে উপেক্ষা করে না।